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囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗的制备及理化性质的检测

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【作者】 李元李宗吉丁淑琴

【Author】 Li Yuan;Li Zongji;Ding Shuqin;Clinical College Laboratory department of Ningxia Medical University;

【通讯作者】 李宗吉;

【机构】 宁夏医科大学临床医学院检验系

【摘要】 笔者制备了囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗(Recombinant Echinoccocus granulosus 14-3-3,r Eg14-3-3),观察并分析脂质体疫苗的脂质体形态、疫苗抗原包封率及动物使用的安全性,确定囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗的制备工艺。笔者以DOPC、DOPG、MPBL等磷脂物质为原料,采用薄膜分散法制成均匀脂质薄膜,脂膜与14-3-3和MPLA水合、超声后制备出包载14-3-3蛋白和MPLA的多层交联脂质体疫苗。采用电子显微镜测定脂质体的形态。采用BCA蛋白定量法检测r Eg14-3-3脂质体疫苗的抗原包封率。将r Eg14-3-3脂质体疫苗和空脂质体分别注射入5只6周龄ICR小鼠皮下,观察其生物安全性,并在0周、2周、4周、6周和10周从尾部静脉采血,收集血清,用ELISA法检测14-3-3脂质体疫苗免疫后特异性Ig G抗体水平。制备的脂质体疫苗为乳白色形态较均一的球形,疫苗包封率为72.45%,体外释放缓慢,性状稳定,对小鼠无明显毒副作用。14-3-3脂质体免疫组小鼠Ig G水平在免疫后2周后迅速升高,与空白脂质体组相比差异显著。薄膜分散-超声法制备囊性包虫多层交联脂质体疫苗,抗原包封率高、性状稳定、安全无毒。该脂质体疫苗可有效诱导机体特异性免疫应答。

【关键词】 rEg14-3-3蛋白磷酰脂质A脂质体包封率
【基金】 宁夏自然科学基金面上项目NZ17064
【所属期刊栏目】 兽医科技 (2018年36期)
  • 【分类号】S859.5
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