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青虾源维氏气单胞菌双重PCR检测方法的建立

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【作者】 刘晓丹肖自东孙威李席席周一凡张晓君

【Author】 LIU Xiao-dan;XIAO Zi-dong;SUN Wei;Li Xi-xi;ZHOU Yi-fan;ZHANG Xiao-jun;College of Animal Science and Technology,Yangzhou University;

【通讯作者】 张晓君;

【机构】 扬州大学动物科学与技术学院

【摘要】 根据NCBI已发表的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)促旋酶B亚单位基因gyrB和编码细菌RNA聚合酶σ70因子基因rpoD的保守序列设计引物,建立了一种快速检测青虾源维氏气单胞菌的双重PCR检测方法。结果显示:青虾源维氏气单胞菌gyrB和rpoD基因PCR扩增产物大小分别为815 bp、554 bp,而对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、哈维弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、非O1霍乱弧菌(non-O1 Vibrio cholerae)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)扩增结果皆为阴性;灵敏性试验结果显示该方法检测到的最低菌体DNA量为1.8×10-2 ng/μL,且10份送检样本检测结果与传统细菌分离鉴定结果相一致。结果表明,双重PCR检测方法特异性好、灵敏性高,适用于青虾源维氏气单胞菌的快速检测。

【基金】 江苏省现代农业产业技术体系建设项目02(青虾产业技术体系);国家自然科学基金(31972830);扬州大学‘青蓝工程’项目
  • 【DOI】10.13721/j.cnki.dsyy.2020.01.011
  • 【分类号】S943
  • 【下载频次】76
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