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对硫磷纳米抗体筛选及分子识别机制研究

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【作者】 张玉琪张瑾如王锋李家冬司睿吕丽珊沈玉栋王弘HAMMOCK Bruce D孙远明

【Author】 ZHANG Yu-Qi;ZHANG Jin-Ru;WANG Feng;LI Jia-Dong;SI Rui;LYU Li-Shan;SHEN Yu-Dong;WANG Hong;HAMMOCK Bruce D;SUN Yuan-Ming;Guangdong Provincial Key Laboratory of Food Quality and Safety, National-Local Joint Engineering Research Center for Processing and Safety Control of Livestock and Poultry Products, College of Food Science,South China Agricultural University;Guangzhou Annuo Technology Co., Ltd;Department of Entomology and UCD Comprehensive Cancer Center,University of California;

【通讯作者】 沈玉栋;王弘;

【机构】 华南农业大学食品学院,广东省食品质量与安全重点实验室,畜禽产品精准加工与安全控制技术国家地方联合工程研究中心(广东)广州安诺科技股份有限公司Department of Entomology and UCD Comprehensive Cancer Center,University of California,Davis

【摘要】 对硫磷是一种广谱的有机磷酸酯类杀虫、杀螨剂,毒性极强,可对环境和人类健康造成严重危害。尽管我国已禁止使用对硫磷,但仍存在违禁使用现象,加强对其监测十分必要。纳米抗体是已知最小的与抗原结合的片段(15 kDa),来源于骆驼科动物体内重链抗体的可变区,具有稳定性强、灵敏度高、易表达、水溶性好等特性。本研究基于噬菌体展示技术构建了抗对硫磷纳米抗体库,其库容为2.41×107 cfu/mL,经抗原-抗体固相亲和筛选及噬菌体酶联免疫法(Phage ELISA)鉴定,获得5种抗对硫磷纳米抗体VHH1、VHH6、VHH13、VHH21和VHH24。以结合能力最强的VHH1为基础,采用同源建模和分子对接技术探讨VHH1与对硫磷分子的识别机制,发现VHH1与对硫磷存在氢键和疏水间分子作用力,关键氨基酸是Ser60、Lys104、Phe105、Gly106和Arg107。本研究为抗体的进化改造和半抗原的设计提供了新思路。

【关键词】 纳米抗体对硫磷噬菌体展示分子模拟
【基金】 十三五重点研发计划项目(Nos.2016YFE0106000,2018YFC1602904);广州市科技计划项目(No.201804020077);广东省重点领域研发计划项目(No.2019B020211002);广东省高等学校珠江学者岗位计划项目(2017)资助~~
【所属期刊栏目】 研究报告 (2019年09期)
  • 【DOI】10.19756/j.issn.0253-3820.181772
  • 【分类号】TQ453.22
  • 【下载频次】69
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