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柑橘酸性转化酶基因片段的克隆

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【作者】 安新民徐昌杰张上隆

【Author】 An Xinmin, Xu Changjie, and Zhang Shanglong (Department of Horticulture, Huajiachi Campus, Zhejiang University, Hangzhou 310029)

【机构】 浙江大学华家池校区园艺系!杭州 310029浙江大学华家池校区园艺系!杭州 310029浙江大学华家池校区园艺系!杭州 310029

【摘要】 分析植物液泡和细胞壁转化酶基因的保守区序列,分别设计一对PCR引物,以柑橘基因组DNA为模板,采用PCR方法分别扩增出长约740 bp和530 bp的DNA片段,分别克隆入pBS-T 和pMD18-T载体,进行测序,结果表明,获得柑橘酸性转化酶基因家族的两个成员,成员A和B基因片段分别长742 bp和524 bp。其序列已在GenBank中登记(登记号分别为AF014925和AF314197)。在GenBank中进行同源性检索,结果表明,成员A编码的氨基酸与植物液泡酸性转化酶的氨基酸同源性较高,与拟南芥的最高,达76%,而成员B编码的氨基酸与植物细胞壁酸性转化酶的氨基酸同源性较高,与豌豆的最高,达71%。两成员核苷酸和氨基酸序列同源性分别为55% 和50%,推测酸性转化酶基因成员A 和B编码的蛋白分别定位于液泡和细胞壁。

【关键词】 柑橘酸性转化酶基因克隆
【基金】 国家自然科学基金重点项目(批准号39730340)资助。
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2001.04.001
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】40
  • 【下载频次】260
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