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葡萄总RNA提取方法的研究

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【作者】 张今今王跃进王西平杨克强杨进孝

【Author】 Zhang Jinjin,Wang Yuejin  ,Wang Xiping,Yang Keqiang,and Yang Jinxiao (Horticultural College,Northwest Science&Technology University of Agriculture&forestry,Yangling,Shaanxi712100China)

【机构】 西北农林科技大学园艺学院西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌712100陕西杨凌712100陕西杨凌712100

【摘要】 针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了改进SDS/酚法、异硫氰酸胍法和市售总RNA提取试剂盒等不同的提取方法,3种改进方法均能从葡萄幼嫩叶片中提取到总RNA。其中改进的SDS/酚法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,能够从成熟的叶片和完熟果实的果皮中获得质量高、完整性好的总RNA,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,A260/A280介于1.8~2.0之间,A260/A230大于2.0,且总RNA产率高,其中幼叶总RNA产率为261.20μg/g,成熟叶产率为191.40μg/g,完熟果皮产率为31.50μg/g,完全适于进行DDRT-PCR、Northernbolt和cDNA文库构建等研究。且该方法具有快速、简单、有效的特点。

【关键词】 葡萄多酚多糖SDS/酚法总RNA提取
【基金】 国家自然科学基金资助项目(39970524和30170653);863计划(2001AA241172);国家“十五”科技攻关项目(2002BA515B11)。
  • 【分类号】S663.1
  • 【被引频次】218
  • 【下载频次】1703
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