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草莓镶脉病毒的PCR检测及特异片段的序列分析

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【作者】 周厚成李思源何水涛郭蔼光赵霞郝淑红

【Author】 ZHOU Hou-cheng, LI Si-yuan,HE Shui-tao,GUO Ai-guang, ZHAO Xia, HAO Shu-hong (College of Life Science,Northwestern Science & Technology University of Agriculture & Forestry, Yangling, Shaanxi 712100 China; Zhengzhou Fruit Research Institute, CAAS, Zhengzhou, Henan 450009 China)

【机构】 西北农林科技大学生命科学学院中国农业科学院郑州果树研究所中国农业科学院郑州果树研究所 陕西杨凌 712100 中国农业科学院郑州果树研究所郑州 450009陕西杨凌 712100郑州 450009

【摘要】 用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PCR特异扩增产物,与pMD18-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道SVBVCP基因序列(序列号:Nc001725)的核苷酸同源性为89.2%,氨基酸同源性为96.3%。该特异片段序列在GenBank中的登记号为AY862389。

【关键词】 草莓镶脉病毒检测PCR序列
【基金】 河南省科技攻关重点项目(编号:0423012100)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2005.03.024
  • 【分类号】S436.68
  • 【被引频次】24
  • 【下载频次】209
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