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杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建

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【作者】 刘威生冯晨静杨建民刘冬成张爱民李绍华

【Author】 LIU Wei-sheng1,2, FENG Chen-jing3,YANG Jian-min3,LIU Dong-cheng4, ZHANG Ai-min4, LI Shaohua5*(1College of Agronomy and Biotechnology,China Agricultural University,Beijing 100094 China; 2Liaoning Institute of Pomology, Xiongyue, Liaoning 115009 China; 3Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071001 China; 4Institute of Genetic and Developmental Biology,Chinese Academy of Science,Beijing 100101 China;5Institute of Botany,Chinese Academy of Science, Beijing 100093 China)

【机构】 中国农业大学农学与生物技术学院河北农业大学中国科学院遗传与发育生物学研究所中国科学院植物研究所 北京100094 辽宁省果树科学研究所辽宁熊岳115009河北保定071001北京100101北京100093

【摘要】 以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系为:20μL的反应体系中含10ng模板DNA、0.1mmol/LdNTP、0.25μmol/LPrimer、2.5mmol/LMg2+,0.5UTaqPolymerase。适宜退火温度为50-52.1℃。用引物UBC825和UBC868〔序列为(GAA)5〕在优化的反应条件下建立了5个种12份杏材料的ISSR指纹图谱。

  • 【分类号】S662.2
  • 【被引频次】112
  • 【下载频次】467
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