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苹果SSR反应体系的建立

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【作者】 徐兴兴梁海永甄志先杨敏生

【Author】 XU Xing-xing ,LIANG Hai-yong, ZHEN Zhi-xian,YANG Min-sheng* (College of Forestry, Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071000 China)

【机构】 河北农业大学林学院河北农业大学林学院 河北保定071000河北保定071000

【摘要】 为摸索适宜苹果的SSR反应体系,以金冠苹果为试验材料,研究了苹果SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合苹果的SSR反应体系为:在20μL反应体系中,Mg2+、引物和dNTP的最适浓度分别为2.5mmol/L、0.8μmol/L、0.10mmol/L;反应体系中TaqDNA聚合酶宜加入1U,模板DNA应加入15-30ng;引物的最佳退火温度为48.5-52.0℃。并利用该反应体系对10个苹果代表品种进行SSR反应,用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同品种间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。

【关键词】 苹果金冠SSR反应体系
【基金】 河北省林业局资助项目。
  • 【分类号】S661.1
  • 【被引频次】43
  • 【下载频次】431
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