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果实特异启动子调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体的构建

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【作者】 郭庆勋秦智伟李景鹏

【Author】 GUO Qing-xun1,QIN Zhi-wei2*, LI Jing-peng2(1Jilin University, Changchun, Jilin 130062 China; 2Northeast Agricultural University,Harbin, Heilongjiang 150030 China)

【机构】 吉林大学东北农业大学东北农业大学 长春130062哈尔滨150030

【摘要】 应用反义RNA技术抑制甜瓜成熟过程中内源乙烯的合成,从而培育耐贮运品种是解决甜瓜延熟保鲜难题的可行新方法。根据GenBank中甜瓜、黄瓜ACC合成酶基因氨基酸保守序列设计引物,从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到约0.7kb的ACC合成酶cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为777bp,编码258个氨基酸;从番茄(东农706)叶片组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约2.2kb的E8基因片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为2192bp;以pCAM2301为起始植物表达载体,pCAM-GT为中间载体,成功构建了果实特异启动子(E8)调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体,采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。

【基金】 黑龙江省科技攻关项目(GB01B402-01)。
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2006.03.021
  • 【分类号】S652
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】258
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