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葫芦科作物3种主要病毒的多重RT-PCR方法的建立

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【作者】 赵丽古勤生陈红运史团省田延平胡京昂

【Author】 ZHAO Li1,2,GU Qin-sheng2,CHEN Hong-yun3,SHI Tuan-sheng1,TIAN Yan-ping2,HU Jing-ang2(1Bioengineering Department,Zhengzhou University,Zhengzhou,Henan 450001 China;2Zhengzhou Fruit Research Institute,CAAS,Zhengzhou,Henan,450009 China;3Xiamen Entry-Eixt Inspection and Quarantine Bureau,Xiamen,Fujian 361012 China)

【机构】 郑州大学生物工程系中国农业科学院郑州果树研究所厦门出入境检验检疫局

【摘要】 小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellowmosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是危害葫芦科作物最严重、最广泛的3种病毒。研究建立了以18SrRNA为内标检测ZYMV、CMV和WMV侵染葫芦科作物3种主要病毒的多重RT-PCR方法,并对影响多重RT-PCR扩增的退火温度、Taq聚合酶浓度、dNTPs浓度和镁离子浓度4种主要因素进行优化;对多重RT-PCR的灵敏性进行了测定,并与单重RT-PCR灵敏性进行比较。结果表明:最佳的退火温度、Taq聚合酶量、dNTPs浓度和Mg2+浓度分别为60.7℃、1.0U、0.8mmol/L和2.5mmol/L。多重RT-PCR各病毒的灵敏度与单重RT-PCR相同。

【基金】 河南省科技攻关项目(082102150012)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2008年05期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2008.05.018
  • 【分类号】S642.6
  • 【被引频次】16
  • 【下载频次】236
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