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灰枣成熟叶片DNA提取及ISSR反应体系构建

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【作者】 李继东毕会涛李海涛李振山冯建灿陈红卿

【Author】 LI Ji-dong1,BI Hui-tao1,LI Hai-tao1,2,LI Zhen-shan1,FENG Jian-can1,CHEN Hong-qing3,(1College of Forestry and Horticulture,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002 China;2Xinzheng Jujube Insitute,Xinzheng,Hennan 451100 China;3Departmen of Forestry,Yanshi county,Henan 471900 China)

【机构】 河南农业大学林学园艺学院河南省新郑市枣树科学研究所偃师市林业局

【摘要】 针对枣DNA提取须用幼嫩叶片或组织培养幼苗这一限制相关实验顺利进行的问题,对常用的DNA提取方法CTAB法进行了改良,在破碎细胞之后,先加入2%β巯基乙醇,3%PVP,100mmol/LEDTA以去除成熟叶片细胞质中的多酚等次生物质,再加核裂解液CTAB以释放DNA。改良的CTAB法提取灰枣成熟叶片基因组DNA,分光光度法检测该法提取的样品DNA得率为55.1~79.1μg/g,D260nm/280nm为1.78~1.87;琼脂糖凝胶电泳检测的结果表明,该法提取的样品DNA分子量为23kb左右;该法提取的样品DNA可以被EcoRI和HindⅢ限制性内切酶进行切割。在此基础上构建了方便快捷的灰枣ISSR反应体系。

【关键词】 灰枣DNA提取ISSR
【基金】 河南省重点攻关项目(072102140001)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2008年06期)
  • 【分类号】S665.1
  • 【被引频次】13
  • 【下载频次】209
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