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草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立

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【作者】 刘敏滕文静董清华晁慧娟李凤岚邱德有

【Author】 LIU Min1,3,TENG Wen-jing2,3,DONG Qing-hua1, CHAO Hui-juan1,LI Feng-lan4, QIU De-you2,3 (1Department of Plant Science and Technology, Beijing Agricultural College, Beijing 102206 China; 2Institute of Forestry, Chinese Acade- my of Forestry, Beijing 100091 China; 3Key Laboratory of Tree Breeding, State Forest Administration, Beijing 100091 China; 4Research Institute of Medicinal Plant, Peking Union Medical University, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100094 China)

【机构】 北京农学院植物科学技术系国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所

【摘要】 将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane13α-hydroxylase,13OH)基因全长cDNA正向插入到pCAMBI-A1304,构建其植物表达载体pCT13OH;将水稻小RNA169d(microRNA169d,miRNA169d)基因前体(precursor)全长DNA正向插入到pCAMBIA1305.1,构建其植物表达载体pCO169d。用电击法把它们导入根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株。用1mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragaria×ananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达。对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12h和0.5mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因13OH和调节基因miRNA169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功。

【关键词】 草莓果实瞬时表达根癌农杆菌基因功能
【基金】 国家高技术研究发展计划—“863”计划(2007AA10Z182);国家自然科学基金(30671698);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(200701);北京市教委植物遗传育种改良与种质资源创新平台(5075201029)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2009年01期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2009.01.012
  • 【分类号】S668.4
  • 【被引频次】13
  • 【下载频次】615
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