节点文献

锥栗自然居群ISSR-PCR分析技术的建立

免费订阅

【作者】 刘国彬龚榜初罗正荣

【Author】 LIU Guo-bin1,2,GONG Bang-chu1*,LUO Zheng-rong2 (1Research Institute of Subtropical Forestry, Chinese Academy of Forestry, Fuyang, Zhejiang 311400 China; 2Key Laboratory for Horticul- tural Plant Biology, Ministry of Education, Huazhong Agricultural University, Hubei, Wuhan 430070 China)

【机构】 中国林业科学研究院亚热带林业研究所华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室

【摘要】 提取野生锥栗的基因组DNA作为ISSR-PCR模板,对反应体系中的模板用量、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和TaqDNA聚合酶用量5个主要影响因素进行梯度试验,并对扩增程序中的退火温度与循环次数进行了探讨,初步确立了适合野生锥栗的ISSR-PCR分析技术体系,即25μL反应体系中,模板DNA40或50ng、Mg2+2.25mmol.L-1、dNTPs0.2mmol.L-1、引物0.2μmol.L-1、TaqDNA聚合酶1.0U;PCR扩增程序为:94℃预变性3min;然后94℃变性45s,(Tm+2~4℃)退火45s,72℃延伸2min,共32个循环;最后72℃充分延伸5min;1.5%琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物。

【关键词】 锥栗自然居群ISSR
【基金】 国家农业科技成果转化资金项目“锥栗优良新品种中试与产业化示范”(2007GB24320385);国家林业局重点项目“锥栗优良新品种示范”([2007]-74号)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2009年01期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2009.01.022
  • 【分类号】S664.2
  • 【被引频次】6
  • 【下载频次】160
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: