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双T-DNA共转化获得转基因番木瓜

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【作者】 何玮毅陈晓静叶一江申艳红卢秉国

【Author】 HE Wei-yi1,2, CHEN Xiao-jing1,2, YE Yi-jiang1,2, SHEN Yan-hong1,2, LU Bing-guo1 (1College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, 2Institute of Genetics and Breeding in Horticultural Plants, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou, Fujian 350002 China)

【机构】 福建农林大学园艺学院福建农林大学园艺植物遗传育种研究所

【摘要】 番木瓜采后期间的迅速软化现象,导致果实的货架期十分短暂。利用RNAi-β-Gal双T-DNA植物表达载体p2301/TTRG,通过农杆菌介导,探索了液体振荡转化法和浸泡转化法对番木瓜胚性愈伤组织共转化效率的影响。经抗生素敏感性测定,将卡那霉素筛选质量浓度确定为150mg·L-1。在该质量浓度下,2种方法均获得了转基因再生植株,但转化效率仍较低。正交试验结果表明,浸泡转化法中各处理因素的作用大小为:AS质量浓度>共培养时间=菌液光密度值=侵染时间,最佳共转化组合为:100μmol·L-1AS+菌液光密度值0.2+侵染20min+共培养3d。经PCR和Southern杂交检测,所获得的5株再生植株中有2株为共转化的结果,诱导了其中1株生根并移栽。为进一步选育无选择标记基因的抗软化转基因番木瓜奠定了基础。

【关键词】 番木瓜果实软化双T-DNA共转化植株
【基金】 福建省科技厅重点项目(编号:2008N0008)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2010年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2010.03.012
  • 【分类号】S667.9
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】171
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