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磁珠富集法分离菠萝蜜(Artocarpus heterophyllus)微卫星标记及系列分析

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【作者】 王艳红李映志丰锋叶春海

【Author】 WANG Yan-hong,LI Ying-zhi,FENG Feng,YE Chun-hai (College of Agriculture,Guangdong Ocean University,Zhanjiang,Guangdong 524088 China)

【机构】 广东海洋大学农学院

【摘要】 利用磁珠富集法分离出菠萝蜜微卫星位点,并成功设计出菠萝蜜(Artocarpus heterophyllus Lam.)SSR(简单序列重复,Simple sequence repeat)分子标记引物。基因组DNA经MseI酶切后,用生物素标记的简单重复序列做探针与其杂交,杂交复合物固定到包被有链霉亲和素的磁珠上,经过一系列的洗涤过程,含有SSR的酶切片段被吸附到磁珠表面。这些片段经洗脱下来后,先用对应的引物扩增,再进行克隆和测序。实验共挑出83个阳性克隆进行测序,成功设计合成SSR引物19对。并通过这19对SSR引物对20份菠萝蜜种质资源进行分析,全部能扩增出特异性条带,其中18对引物扩增的条带具有多态性,可以作为菠萝蜜分子标记使用。

【关键词】 菠萝蜜微卫星磁珠富集法
【基金】 国家自然科学基金(30771481);广东省自然科学基金(07010103);广东省科技攻关计划(2007020200006)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2010年06期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2010.06.015
  • 【分类号】S667.8
  • 【被引频次】6
  • 【下载频次】233
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