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柑橘碎叶病毒巢式RT-PCR检测方法建立及应用

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【作者】 宋震周常勇刘科宏李中安

【Author】 SONG Zhen,ZHOU Chang-yong*,LIU Ke-hong,LI Zhong-an(Citrus Research Institute of Southwest University,Citrus Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences,Chongqing 400712 China)

【机构】 西南大学柑桔研究所/中国农业科学院柑桔研究所

【摘要】 柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)是威胁柑橘生产的重要病原之一。本研究在柑橘碎叶病毒一步法RT-PCR检测体系的基础上建立了CTLV的巢式RT-PCR检测方法,并对其检测灵敏度及特异性进行了分析。结果表明,该方法检测灵敏度比一步法RT-PCR至少提高100倍,检测模板总核酸的最低浓度约1.27μg·L-1,具有良好的特异性。在对142个田间样品、24个茎尖苗及20个接毒的腊斯克枳橙的检测中,巢式RT-PCR的CTLV检出率最高,为21.5%,比半巢式RT-PCR检出率高3.2%,比一步法RT-PCR检出率高2.1%。该方法灵敏度高,特异性强,适用于对无病毒苗木生产的监控和田间样品的快速检测。

【关键词】 柑橘碎叶病毒巢式RT-PCR检测技术
【基金】 公益性行业科研专项(NYHYZX07-023,200903004-06);中央高校基本科研业务专项(XDJK2009C131);重庆市自然科学基金(CSTC,2010BB115)
【所属期刊栏目】 研究论文 (2011年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2011.03.002
  • 【分类号】S436.66
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】203
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