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西瓜交替氧化酶AOX2基因的克隆与分析

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【作者】 李严曼朱磊杨景华张明方

【Author】 LI Yan-man,ZHU Lei,YANG Jing-hua,ZHANG Ming-fang (Department of Horticulture,the State Agriculture Ministry Laboratory of Horticultural Plant Growth,Development & Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou,Zhejiang 310029 China)

【机构】 浙江大学农业与生物技术学院园艺系农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室

【摘要】 为了研究西瓜交替氧化酶基因家族在西瓜植株中可能发挥的功能,以西瓜(Citrullus lanatus)耐冷种质IVSM9为材料,根据植物不同物种交替氧化酶基因核苷酸保守区序列设计兼并引物,得到西瓜交替氧化酶(alterna-tive oxidase)AOX基因的中间片段。在已知序列的基础上,分别设计5’和3’末端扩增的特异引物,采用cDNA末端快速扩增(RACE)的方法得到西瓜交替氧化酶基因的5’端和3’端序列,用DNAMAN5.22软件对3个序列进行拼接和分析,获得全长序列。得到的基因片段同其他物种AOX基因家族中的alternative oxidase-2(AOX2)基因具有高度的同源性,因此命名ClAOX2。根据拼接得到的cDNA全长序列设计5’和3’两端引物,得到ClAOX2基因DNA和cDNA的全长序列。该基因cDNA全长为1 263 bp,开放阅读框架为1 050 bp,编码349个氨基酸。DNA全长1 983bp,存在3个内含子。目前该基因已在GenBank注册,登录号为ADD84880。荧光定量分析表明,ClAOX2基因在西瓜根、茎、叶、花、果等各个组织中均有表达,且在果实中的表达量最高。因此推测该基因可能在西瓜果实的发育中发挥作用。

【关键词】 西瓜交替氧化酶克隆基因表达
【基金】 国家自然科学基金(NSFC30771478);国家现代农业产业技术体系(CARS-26-17);国家高技术研究发展计划(863计划)(2010AA10A107-2)
【所属期刊栏目】 研究报告 (2011年05期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2011.05.030
  • 【分类号】S651
  • 【被引频次】9
  • 【下载频次】305
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