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苹果叶片总蛋白提取及其双向电泳分析

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【作者】 张彩霞李壮张利义田义康国栋陈莹丛佩华

【Author】 ZHANG Cai-xia1,2,LI Zhuang1,2,ZHANG Li-yi1,2,TIAN Yi1,2,KANG Guo-dong1,2,CHEN Ying1,2,CONG Pei-hua1,2*(1 Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops(Germplasm Resources Utilization),Ministry of Agriculture,Xingcheng,Liaoning 125100 China;2Research Institute of Pomology,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Xingcheng,Liaoning 125100 China)

【机构】 农业部园艺作物种质资源利用重点实验室中国农业科学院果树研究所

【摘要】 蛋白质提取方法和电泳条件的建立是蛋白质组学研究中双向电泳分析的关键。通过比较不同提取方法,包括酚/SDS抽提、TCA-丙酮沉淀法、甲醇/醋酸铵沉淀法以及改良HB-酚抽提方法。此外,还优化了样品上样量、等电聚焦程序设置等条件。从所得2-D图谱分离效果来看,改良HB-酚抽提方法所得蛋白点数最多,2-D图谱背景清晰、分离效果好,明显优于其他3种方法。300μg上样量可作为苹果叶片总蛋白2-DE分析的理想的上样量,同时优化了等电聚焦程序,最终得到的2-D图谱分离效果较为理想。该研究的开展也为苹果叶片蛋白质组学后续研究奠定了基础。

【关键词】 苹果叶片总蛋白提取方法双向电泳
【基金】 国家自然科学基金(30900968);现代苹果产业技术体系(nycytx-08-01)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2012年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2012.03.013
  • 【分类号】S661.1
  • 【被引频次】18
  • 【下载频次】468
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