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橄榄基因组AFLP扩增体系的优化

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【作者】 王燕平陈勤周志钦周俊辉

【Author】 WANG Yan-ping1,3,4,CHEN Qin2,ZHOU Zhi-qin1,4*,ZHOU Jun-hui3*(1College of Horticulture and Landscape Architecture,Southwest University,Chongqing 400716 China;2Chaozhou Institute of Pomology,Chaozhou,Guangdong 515726 China;3College of Horticulture and Landscape Architecture,Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou,Guangdong 510225 China;4Key Laboratory of Horticulture Science for Southern Mountainous Regions,Ministry of Education,Chongqing 400715 China)

【机构】 西南大学园艺园林学院仲恺农业工程学院园艺园林学院南方山地园艺学教育部重点实验室广东省潮州市果树研究所

【摘要】 为建立适于橄榄研究用的AFLP技术体系,以10个橄榄品种为材料,对其基因组DNA从酶切、连接、预扩增和选择性扩增等方面进行条件优化。研究结果表明,DNA模板用量为500 ng,酶切体系中限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ各加入3 U,37℃水浴4 h;连接体系中T4DNA连接酶加入1.5 U,16℃连接6 h;并利用优化后的预扩增体系和选择性扩增体系筛选出6对适合于橄榄AFLP分析的引物组合:E/AAC-M/CAT、E/AAC-M/CTT、E/ACA-M/CAA、E/AGG-M/CAA、E/ACC-M/CAA、E/ACT-M/CAT。采用该体系得到的电泳条带清晰可靠、多态性好,可用于对橄榄遗传多样性的研究。

【关键词】 橄榄AFLP优化
【基金】 广东省农业攻关项目(2010B020305012);广东省农业科技项目(200844512)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2012年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2012.03.033
  • 【分类号】S667.5
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】111
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