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根癌农杆菌介导的CG1-400-RNase基因转化创制锦橙转基因再生植株

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【作者】 谭彬李鼎立徐世晓郭文武

【Author】 TAN Bin1,2,LI Ding-li1,XU Shi-xiao1,GUO Wen-wu1(1Key Laboratory of Horticultural Plant Biology Affiliate to Ministry of Education·Huazhong Agricultural University,Wuhan,Hubei 430070 China;2College of Horticulture,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002 China)

【机构】 园艺植物生物学教育部重点实验室·华中农业大学河南农业大学园艺学院

【摘要】 【目的】为了快速有效地利用基因工程的方法获得柑橘无核新种质,【方法】以我国特色多核柑橘优良品种锦橙实生苗上胚轴切段为外植体,采用根癌农杆菌介导法进行能导致种子败育基因CG1-400-RNase的转化;为快速有效地筛选出转化子,在实生苗上胚轴切段转化再生过程中,根据不同发育阶段的组织或器官对抗生素的敏感程度不同采用不同的选择压。【结果】结果表明,在抗性芽再生过程中卡那霉素质量浓度设定为50 mg.L-1,获得的362个抗性芽转入卡那霉素质量浓度为100 mg.L-1的伸长培养基中进行伸长培养后,进行早期PCR检测,获得28个阳性芽;经过不定芽诱导生根或试管嫁接,获得22株完整植株。【结论】再生植株经PCR和Southern杂交检测,获得2株目的基因以单拷贝的形式插入锦橙基因组的转基因植株,为最终获得具有无核性状且可稳定遗传的柑橘新种质奠定了基础。

【关键词】 柑橘根癌农杆菌CG1-400-RNase基因
【基金】 国家863计划(2011AA100205);国家自然科学基金项目(31125024)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2012年04期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2012.04.012
  • 【分类号】S666.4
  • 【被引频次】7
  • 【下载频次】171
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