节点文献

利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清

免费订阅

【作者】 代红艳于翠梅张志宏李贺马跃刘月学

【Author】 DAI Hong-yan,YU Cui-mei,ZHANG Zhi-hong,LI He,MA Yue,LIU Yue-xue(College of Horticulture,Shenyang Agricultural University,Shenyang,Liaoning 110866 China)

【机构】 沈阳农业大学园艺学院

【摘要】 【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒(SMYEV)外壳蛋白(CP)为抗原制备抗血清的方法,从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达,分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行免疫。血清效价达到要求后,分离纯化抗血清并利用DAC-ELISA对草莓植株进行SMYEV检测,同时利用RT-PCR对DAC-ELISA检测结果进行验证。【结果】宿有SMYEV CP基因的大肠杆菌经IPTG诱导后出现一条52.0 ku左右的特异性重组蛋白谱带,以纯化的重组蛋白为抗原制备出专一性较强的针对SMYEV的抗血清,该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV。利用DAC-ELISA和RT-PCR对26份草莓试材分别进行SMYEV检测,2种检测方法的检测结果基本一致。【结论】以原核表达的SMYEV CP为抗原可以制备出专一性较强、效价较高的SMYEV的抗血清。

【基金】 国家科技支撑计划课题(2011BAD12B02)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2013年04期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.2013.04.002
  • 【分类号】S436.68
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】110
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: