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叶片中烯脂酰-CoA还原酶基因PsECR的筛选及其启动子的克隆表达分析

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【作者】 赵利陈桂信王玉珍吕恃衡潘东明姜翠翠

【Author】 ZHAO Li;CHEN Gui-xin;WANG Yu-zhen;L Shi-heng;PAN Dong-ming;JIANG Cui-cui;College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University;Institute of Storage Science and Technology of Horticultural Products,College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;Fruit Research Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences;

【通讯作者】 陈桂信,

【机构】 福建农林大学园艺学院福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所福建省农业科学院果树研究所

【摘要】 【目的】探讨ECR基因在调控蜡质形成过程中分子机制及其启动子的克隆和功能,为其抗病机理研究和基因表达调控模式研究奠定基础。【方法】从已构建好的5个不同生长发育时期叶片的均一化全长cDNA文库中分离得到了一个烯脂酰-CoA还原酶(ECR)基因,命名为PsECR,然后,根据其序列设计引物,采用Genome Walking方法从基因组DNA中分离获得PsECR基因上游的启动子序列,命名为PsECRp。【结果】PsECR序列分析结果表明,该基因的cDNA全长为1 717 bp,5′非翻译区长447 bp,3’非翻译区长337 bp,开放阅读框(ORF)为933 bp,编码311个氨基酸。通过蛋白质序列对比发现PsECR与蔷薇科植物苹果的ECR蛋白质同源性达到93%,荧光定量PCR分析表明,PsECR在幼叶、老叶中的表达量相对其他3个时期明显最低,而叶芽、展开叶、成熟叶中表达量处于同一水平。将得到的PsECRp序列用在线软件plantcare和plant分析表明,该序列除含有启动基本元件,如TATA-Box、CAATBox外,还含有2个防御相关元件(MYB1LEPR)、2个抗病响应元件(BIHD10S)、1个病原菌应答元件(W-Box)、1个真菌诱导反应元件(Box-w1)、2个茉莉酸甲酯响应元件(CGTCA-motif)、1个响应逆境胁迫富TC的重复序列(TCrich repeats)等响应元件。【结论】筛选得到了PsECR基因全长序列,对该基因在叶片的不同生长发育过程中的动态表达分析显示,PsECR基因可能参与叶片蜡质合成的调控。由获得的PsECRp启动子的序列分析表明,可以推测ECR在植物应答抵抗病原菌和逆境胁迫方面起着非常重要的作用。

【基金】 科技部支撑计划项目(2007BAD07B01);福建省种业创新与产业化工程项目;福建农林大学创新团队项目(cxtd12013)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2014年04期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20140030
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】134
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