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菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立

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【作者】 胡加谊李向宏罗志文范鸿雁张治礼刘志昕何凡

【Author】 HU Jiayi;LI Xianghong;LUO Zhiwen;FAN Hongyan;ZHANG Zhili;LIU Zhixin;HE Fan;Institute of Tropical Fruit Trees,Hainan Academy of Agricultural Science/Haikou Investigation Station of Tropical Fruit Trees,Ministry of Agriculture;College of Environment and Plant Protection,Hainan University;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Science;

【通讯作者】 何凡,男,研究员, 硕士生导师, 从事果树病理学研究,

【机构】 海南省农业科学院热带果树研究所·农业部海口热带果树科学观测实验站海南省农垦科学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【摘要】 【目的】建立菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据PMWa V-3外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物和探针,通过优化PMWa V-3实时荧光定量PCR检测体系,构建以重组质粒为标准品的标准曲线,建立起PMWa V-3实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能特异性地检测PMWa V-3,且灵敏度是普通RTPCR的10倍;该方法重复性良好,组间和组内变异系数均小于1.73。【结论】建立的实时荧光定量PCR方法是一种快速、简便、可信度高的PMWa V-3定量检测方法。

【基金】 公益性行业(农业)科研专项经费项目(201203021);海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013020-3);海南省科学事业费项目(琼财预[2013]131号);海南省重点科技计划应用研究及产业化项目(ZDXM20130031);海南省自然科学基金项目(琼科[2013]32号)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2015年01期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20140127
  • 【分类号】S436.68
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】176
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