节点文献

一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法

免费订阅

【作者】 王静毅冯仁军柴娟陈友张银东马子龙武耀廷

【Author】 WANG Jingyi;FENG Renjun;CHAI Juan;CHEN You;ZHANG Yindong;MA Zilong;WU Yaoting;Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Tropical Crops,Ministry of Agriculture,Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences(CATAS);Space Breeding Research Center,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences;Agricultural collage of Hainan University;Qiongzhou university;

【机构】 中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所·农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室中国热带农业科学院航天育种研究中心海南大学农学院琼州大学

【摘要】 【目的】提供一种简单、经济、高效的香蕉小分子RNA提取方法,以满足RT-PCR、Northern杂交等分子生物学研究的需要。【方法】以巴西蕉(Musa acuminata L.AAA group,‘Brazilian’)的叶片、雄花、果实和根系为材料,利用改良的CTAB法,结合使用PEG8000分级沉淀DNA和大分子RNA,从而获得小分子RNA。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示小RNA带型清晰,无DNA和大分子RNA干扰,说明小RNA质量较好。获得的小RNA经紫外光谱分析其A260/A280的比值在1.872~2.020,产量可达35μg·g-1。以提取的各组织小分子RNA为模板,利用茎环RT-PCR方法在香蕉不同组织小RNA中均检测到mi RNA156a,其扩增片断大小约为70 bp,且测序结果与预测的香蕉mi R156a序列一致。【结论】本实验提供了一种简便高效的香蕉小分子RNA提取方法,可满足RT-PCR、Northern blotting及小RNA文库构建等后续分子生物学研究的需要,为研究人员在实际工作中提供了更多的选择。

【关键词】 香蕉小分子RNA提取
【基金】 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(ITBB130201,1630052014006);海南省自然科学基金(312050,312051);国家自然科学基金(31201603);海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013023-1)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2015年02期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20140293
  • 【分类号】S668.1
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】259
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: