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柑橘冷诱导基因及其启动子表达载体构建与瞬时表达分析

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【作者】 周潇姜航屈汉金邓子牛A·Gentile龙桂友

【Author】 ZHOU Xiao;JIANG Hang;QU Hanjin;DENG Ziniu;A.Gentile;LONG Guiyou;Horticulture and Landscape College,Hunan Agricultural University;National Center for Citrus Improvement,Changsha Subcenter;Department of Agriculture and Food Science,University of Catania;

【机构】 湖南农业大学园艺园林学院国家柑橘改良中心长沙分中心卡塔尼亚大学农业与食品科学系

【摘要】 【目的】以YFP为报告基因,构建柑橘冷诱导基因及其启动子的植物表达载体。【方法】克隆获得枳冷诱导基因Ptcor8及其启动子p Ptcor8,柠檬中同源基因Clcor8及其启动子p Clcor8;双酶切含启动子的克隆载体和植物表达原始载体p1D4,连接获得含启动子的中间载体;再双酶切含冷诱导基因的克隆载体和中间载体,连接后获得重组质粒;通过冻融法将重组质粒导入农杆菌EHA105中。【结果】构建了p1D4/p Ptcor8-Ptcor8::YFP,p1D4/p Ptcor8-Clcor8::YFP和p1D4/p Clcor8-Ptcor8::YFP 3个融合表达载体,瞬时表达发现3个融合基因均可在冰糖橙叶片中表达。【结论】3个融合表达载体的成功构建为下一步转化柠檬,分析枳冷诱导基因Ptcor8及其启动子p Ptcor8的功能奠定了基础。

【关键词】 柑橘低温诱导基因载体构建瞬时表达
【基金】 国家863计划项目(2011AA100205);公益性行业(农业)科研专项(201203075-06X)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2015年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20150056
  • 【分类号】S666
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】500
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