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华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析

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【作者】 王辰姚文孔谢小青童威霍王磊王杰王跃进

【Author】 WANG Chen;YAO Wenkong;XIE Xiaoqing;TONG Weihuo;WANG Lei;WANG Jie;WANG Yuejin;College of Horticulture, Northwest A & F University;State Key Laboratory of Crop Stress Biology in Arid Areas;Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops, Ministry of Agriculture;

【机构】 西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

【摘要】 【目的】分析华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’的Ring型泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的转基因植株对葡萄白粉病的抗性,研究这2个基因的抗白粉病特性,为改良欧洲葡萄抗病性提供可用基因。【方法】利用同源克隆的方法获得中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的编码区序列(CDS);通过实时荧光定量PCR方法检测其在白粉菌诱导和水杨酸处理后的葡萄叶片中的表达;使用聚乙二醇(PEG)介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位;通过农杆菌介导法获得转基因‘无核白’和‘红地球’植株;经过苯胺蓝染色,利用血球计数板计数分析白粉菌在转基因植株叶片上的生长情况,鉴定转基因株系的抗病性。【结果】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3响应白粉菌和水杨酸处理,表达模式明显区别于感病对照‘赤霞珠’。中国野生华东葡萄‘白河-35-1’VpUIRP2蛋白定位在细胞质,VpUIRP3蛋白定位无特异性。通过农杆菌介导的遗传转化获得4个VpUIRP2的转基因‘红地球’株系和1个‘无核白’株系,转基因株系对白粉病表现出抗性。【结论】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2能增强葡萄对白粉病的抗性,可以作为抗病基因用于改良欧洲葡萄的抗病性。

【基金】 国家自然科学基金(No.31171924)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2016年12期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20160107
  • 【分类号】S663.1
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】188
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