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苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究

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【作者】 许春景孙迎超吴玉星冯浩高小宁黄丽丽

【Author】 XU Chunjing;SUN Yingchao;WU Yuxing;FENG Hao;GAO Xiaoning;HUANG Lili;College of Plant Protection,Northwest A&F University·State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas;

【机构】 西北农林科技大学植物保护学院·旱区作物逆境生物学国家重点实验室

【摘要】 【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8与寄主互作过程中的表达水平及Vmpl4敲除后PL家族内其他基因的表达水平,通过Doublejoint PCR构建基因敲除载体,并通过PEG介导原生质体遗传转化获取转化子、PCR及Southern blot验证基因敲除突变体。利用苹果叶片和枝条离体接种方法检测突变体致病力;接种至PDA及果胶培养基,观察突变体的营养生长和对果胶的利用情况。【结果】Vmpl4在病菌侵染过程中上调表达高达10.20倍;通过验证得到1个基因敲除突变体,其在叶片和枝条上的致病力均显著降低,在果胶培养基上生长速率也明显降低,Vmpl4敲除后家族内4个基因在病菌侵染过程中表达水平显著上调。【结论】果胶裂解酶基因Vmpl4通过降解果胶参与致病过程,PL家族内其他基因与Vmpl4在病菌致病性方面共同发挥作用。

【基金】 国家自然科学基金(31171796和31471732);国家公益性行业(农业)科研专项(201203034);高等学校博士学科点基金(20120204110002)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2017年01期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20160147
  • 【分类号】S436.611.11
  • 【被引频次】11
  • 【下载频次】544
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