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龙眼胚性愈伤组织AGO10基因克隆及其表达分析

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【作者】 陈荣珠刘转霞陈晓慧徐小萍林玉玲赖钟雄

【Author】 CHEN Rongzhu;LIU Zhuanxia;CHEN Xiaohui;XU Xiaoping;LIN Yuling;LAI Zhongxiong;Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University;Zhangzhou Health Vocational College;

【通讯作者】 赖钟雄;

【机构】 福建农林大学园艺植物生物工程研究所漳州卫生职业学院

【摘要】 【目的】探究龙眼胚性愈伤组织Argonaute10(AGO10)基因的特性与龙眼生长发育、激素响应及非生物胁迫响应之间的关系。【方法】根据龙眼胚性愈伤组织转录组数据库Unigene序列,采用RT-PCR结合RACE技术,以‘红核子’龙眼胚性愈伤组织cDNA为模板,进行龙眼胚性愈伤组织DlAGO10基因的克隆和生物信息学分析,同时利用qRTPCR技术分析DlAGO10基因在龙眼体胚发生过程中、不同组织部位中、对不同激素的响应以及非生物胁迫响应的表达情况。【结果】获得龙眼DlAGO10基因的c DNA全长序列(GeneBank登录号为MH708535),全长共3 859 bp,其中包含完整开放阅读框(ORF)3 003 bp,编码999个氨基酸。生物信息学分析表明,DlAGO10的保守结构域具有AGO的经典结构域PiWi结构,与甜橙和克莱门柚AGO10蛋白同源性较高。qPCR分析结果表明,在龙眼体胚发生过程中,DlAGO10在龙眼非胚性愈伤组织时期和子叶胚时期的表达量较高,在‘红核子’龙眼合子胚S5阶段的相对表达量最高;不同组织部位的表达情况为,DlAGO10在‘红核子’龙眼雌花中表达量最高,雄花次之,其他组织部位表达量均较低。植物激素和非生物胁迫处理下的表达分析表明,一定浓度的2,4-D、KT和水杨酸(SA)均可诱导DlAGO10上调表达,而茉莉酸甲酯(MeJA)即可上调也可下调;盐、渗透、干旱和脱落酸(ABA)胁迫均可上调DlAGO10的表达。【结论】DlAGO10可能参与龙眼体胚发生早期和晚期的转录调控过程,且可能参与生长素、细胞分裂素、SA和ABA的逆境胁迫信号转导途径,调控龙眼多种非生物胁迫应答过程。

【关键词】 龙眼体胚发生AGO10(Argonaute 10)表达分析
【基金】 国家自然科学基金(31572088);福建省重大专项(2015NZ0002-1)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2019年03期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20180298
  • 【分类号】S667.2
  • 【下载频次】251
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