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西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用

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【作者】 焦楠朱宁程春振林玉玲李汉生陈发兴赖钟雄

【Author】 JIAO Nan;ZHU Ning;CHENG Chunzhen;LIN Yuling;LI Hansheng;CHEN Faxing;LAI Zhongxiong;Institute of Horticultural Biotechnology,Fujian Agriculture and Forestry University;

【通讯作者】 赖钟雄;

【机构】 福建农林大学园艺植物生物工程研究所

【摘要】 【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1;最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。

【基金】 福建省高原学科建设经费(102/71201801101);福建农林大学水果产业乡村振兴服务团队项目(102/69914001003)
【所属期刊栏目】 技术与方法 (2019年07期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20190012
  • 【分类号】S667.9
  • 【下载频次】226
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