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四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

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【作者】 吕蕊彭期定杨婷林宏辉董家红席德慧

【Author】 Lü Rui;PENG Qiding;YANG Ting;LIN Honghui;DONG Jiahong;XI Dehui;Key Laboratory of Bio-resources and Eco-environment of Ministry of Education/College of Life Sciences, Sichuan University;Biotechnology and Germplasm Resources Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences/Yunnan Provincial Key Lab of Agricultural Biotechnology/Key Lab of Southwestern Crop Gene Resources and Germplasm Innovation, Ministry of Agriculture;

【通讯作者】 席德慧;

【机构】 四川大学生命科学学院·生物资源与生态环境教育部重点实验室云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所·云南省农业生物技术重点实验室·农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室

【摘要】 【目的】研究猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据。【方法】通过巢式PCR从四川省猕猴桃感病叶片中扩增AcVA CP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用Western blot检测效价。【结果】克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000。【结论】首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控提供了技术支撑。

【基金】 国家自然科学基金(31772131);四川省应用基础研究项目(2019YJ0135)
【所属期刊栏目】 种质资源·遗传育种·分子生物学 (2019年09期)
  • 【DOI】10.13925/j.cnki.gsxb.20190004
  • 【分类号】S436.634.1
  • 【下载频次】72
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