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西瓜花叶病毒2号外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

万莉刘俊君彭学贤黄学森

中国农业科学院郑州果树研究所中国科学院微生物研究所北京植物生物技术开放实验室

摘要:以郑州地区西瓜花叶病病叶分离物──西瓜花叶病毒2号(2-WMV-)为毒源,从繁殖寄主西葫芦病叶中分离、鉴定了病毒。以病毒基因组RNA为模板,逆转录合成cDNA,通过多聚酶链式反应(PCR),从cDNA中扩增和克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因,其中包括3’端非编码区,完成了全部核苷酸序列分析。CP基因全长1099个苷耷酸,其中编码区长903个核苷酸,编码301个氨基酸,3’端非编码区长196个核苷酸。Z-WMV-2CP基因的编码区比A-WMV-2,U-WMV-2两株系的CP基因编码区分别长出60个核耷酸,多编码20个氨基酸。与两个株系相比,编码区的核昔酸序列同源性分别为88.5%和87.0%,氨基酸序列同源性分别为90.0%和88.7%,3,端非编码区的同源性分别为68.3%和71.8%。若不考虑Z-WMV-2多出的60个核苷酸及20个氨基酸,则上述同源性依次为95.4%、93.7%、96.4%、95.0%、88.8%和93.4%。构建了含WMV-2CP基因的大肠杆菌表达载体,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达出了与天然病毒外壳蛋白分子量相同的蛋白。
  • 专辑:

    农业

  • 专题:

    植物保护; 园艺

  • 分类号:

    S436.5

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