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大鼠肾小球系膜细胞原代培养与鉴定

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【作者】 罗华桂华珍郭兵肖瑛石明隽张国忠

【Author】 LUO Hua~1,GUI Hua-zhen~2,GUO Bing~1,XIAO Ying~1,SHI Ming-jun~1,ZHANG Guo-zhong~(1)(1.Department of Pathophysiology,Guiyang Medical College,Guiyang 550004,China;2.Department of Multimedia Enginery Lab,Guiyang Medical College,Guiyang 550004,China)

【机构】 贵阳医学院病理生理学教研室贵阳医学院机能学教研室贵阳医学院病理生理学教研室 贵州贵阳550004贵州贵阳550004

【摘要】 目的:原代培养及鉴定大鼠肾小球系膜细胞(GMC),探索分离、培养GMC的最佳条件。方法:对大鼠双肾灌洗后,筛网滤过分离肾小球,并用Ⅳ型胶原酶消化处理,然后种植法体外培养大鼠肾小球。同时采用免疫细胞化学和免疫荧光技术,检测亚代GMC的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(V im entin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)、Ⅷ因子相关抗原抗体的表达,鉴定GMC,并绘制其生长曲线。结果:种植4 d后,约80%肾小球贴壁,可见卵圆形上皮细胞生长,18 d左右镜下细胞多呈星状或三角形并伴有不规则的突起,21 d后细胞生长密集,细胞团簇之间形成网络。免疫细胞化学和免疫荧光证实抗α-SMA及抗V im entin染色阳性,而抗Cytokera-tin、抗Ⅷ因子抗体染色为阴性。GMC亚代倍增时间为4 d。结论:结果表明,用改良的培养方法成功率高,培养的细胞为大鼠肾小球系膜细胞。

【基金】 贵州省科技厅资助项目(2004-3004)
  • 【DOI】10.19367/j.cnki.1000-2707.2006.02.010
  • 【分类号】Q813.11
  • 【被引频次】13
  • 【下载频次】396
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