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玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

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【作者】 张颖君刘茜胡梦芸高慧敏李辉

【Author】 ZHANG Ying-jun1,LIU Qian1,HU Meng-yun1,GAO Hui-min2,LI Hui1(1.Institute of Cereal and Oil Crops of Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Hebei Crop Genetic Breeding Laboratory,Shijiazhuang 050035,China;2.Institute of Cash Crops,Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Shijiazhuang 050051,China)

【机构】 河北省农林科学院粮油作物研究所河北省作物遗传育种实验室河北省农林科学院经济作物研究所

【摘要】 玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小(1.0、1.5和2.0 mm)的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明:以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为:将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基(N6+24-D 1.5 mg/L+L-脯氨酸0.7 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉8 g/L+硝酸银5μmol/L),在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1(MS+肌醇100 mg/L+蔗糖60 g/L+gelrite 3 g/L),继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2(MS+肌醇100 mg/L+蔗糖30 g/L+gelrite3 g/L)进行光培养,2~3 d即可分化出苗;待幼苗长到4~5 cm高时,移至生根培养基(1/2 MS+IBA0.8 mg/L+蔗糖30 g/L),14~21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。

【关键词】 玉米自交系幼胚再生体系
【所属期刊栏目】 生物科学 (2011年08期)
  • 【DOI】10.16318/j.cnki.hbnykx.2011.08.017
  • 【分类号】S513
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】150
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