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siRNA下调星形胶质细胞中PTEN表达对缺氧复氧诱导细胞凋亡影响

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【作者】 孙屹屹杨丽华李瑞俭王景涛

【Author】 SUN Yiyi;YANG Lihua;LI Ruijian;WANG Jingtao;ICU of Hebi people’s Hospital of Henan Province;Department of Neurology,the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University;

【机构】 鹤壁市人民医院ICU郑州大学第一附属医院神经内科

【摘要】 目的研究siRNA下调星形胶质细胞中第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)表达对缺氧复氧诱导的细胞凋亡影响。方法分离培养乳鼠星形胶质细胞,用携带PTEN siRNA的慢病毒载体感染星形胶质细胞,经缺氧复氧处理后,用Real time PCR和Western blot检测细胞中PTEN表达变化。MTT测定细胞增殖活力,二硝基苯肼比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术测定周期和凋亡变化,Western blot检测细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶4(Cdk4)、p21蛋白水平和胞质中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白水平,JC-1法测定线粒体膜电位。结果携带PTEN siRNA的慢病毒载体感染后的星形胶质细胞中PTEN表达水平降低。缺氧复氧处理后的星形胶质细胞活力降低,细胞LDH漏出率升高,细胞凋亡率升高,细胞G1期比例升高,Cdk4蛋白水平降低,p21蛋白水平升高,胞质中Cytochrome C蛋白增多,线粒体膜电位降低。敲低PTEN可以提高缺氧复氧条件下星形胶质细胞活力,降低细胞LDH漏出率,减少G1期细胞比例,降低细胞凋亡率,促进细胞表达Cdk4蛋白,减少细胞表达p21,减少胞质中Cytochrome C蛋白,提高线粒体膜电位。结论敲低PTEN可以减少缺氧复氧诱导的星形胶质细胞凋亡,作用机制与线粒体凋亡途径有关。

【关键词】 星形胶质细胞凋亡PTEN线粒体缺氧复氧
【基金】 河南省科技攻关项目(编号:162104310248)
【所属期刊栏目】 论著 科研之窗 (2019年23期)
  • 【分类号】R-332
  • 【下载频次】56
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