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基于ELISA的受体竞争结合法检测环境雌激素

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【作者】 高玉秋万延建陈田李媛媛徐顺清

【Author】 GAO Yu-qiu,WAN Yan-jian,CHEN Tian,LI Yuan-yuan,XU Shun-qing* MOE Key Laboratory of Environment and Health, School of Public Health, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030 2009

【机构】 华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所环境与健康教育部重点实验室

【摘要】 为建立环境雌激素的体外快速筛选方法,采用免疫测定介导受体竞争结合试验定量检测环境雌激素.将17β-雌二醇-BSA固定在微孔板上,环境雌激素与微孔板上的17β-雌二醇-BSA竞争性地与雌激素受体结合,与微孔板上17β-雌二醇-BSA结合的受体与雌激素受体的抗体、雌激素受体抗体的二抗形成一个三明治形式的复合物,通过显色剂显色,最后用比色法对试验结果进行定量.结果表明,环境雌激素的浓度与溶液吸光度值成负相关.定量研究可以得到环境雌激素剂量-效应关系曲线,在一定浓度范围内(10ng·L-1~100μg·L-1),溶液的吸光度值与环境雌激素的浓度直接呈现良好的线性关系(R2=0.9583).利用这种方法能检测到的标准品雌二醇的最低浓度为10ng·L-1.以上结果表明,本方法检测环境雌激素操作简便,具有广泛的应用前景.

【关键词】 环境雌激素雌激素受体ELISA17β-雌二醇
【基金】 国家自然科学基金资助项目(No.81030051;No.20677018);国家环境保护公益性行业科研专项项目(No.200909102);973项目课题(No.2008CB418206)
【所属期刊栏目】 方法与技术 (2010年04期)
  • 【分类号】X830.2
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】249
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