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苯胺对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性评价

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【作者】 蒋伟朱洪坤清江

【Author】 Jiang Wei;Zhu Hongkun;Qing Jiang;Technical Center for Industrial Products and Raw Materials Inspection and Testing,Shanghai Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;

【通讯作者】 清江;

【机构】 上海出入境检验检疫局工业品与原材料检测技术中心

【摘要】 探讨不同浓度的苯胺化合物对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性作用,为满足危险化学品分类鉴定和风险评估需求、更好地预防环境化合物对人体健康的损害提供理论依据。体外培养L929细胞,分别将不同浓度的苯胺化合物(0、0.001、0.01、0.1、1、10μg·mL-1)加入培养基中处理细胞,在不同时间点分别取材,MTT检测细胞增殖率,AO/PI染色检测细胞存活率,Annexin V-PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,相关检测试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)的含量及总谷胱甘肽的含量。结果表明,高浓度(1、10μg·mL-1)的苯胺化合物对L929细胞的生长和增殖具有显著的抑制效应。即使浓度降低至0.1μg·mL-1,在处理48 h后,细胞的存活数量显著下降,说明其对细胞增殖具有浓度和时间的累积效应和依赖性。同时,对各组细胞采用流式细胞仪测定细胞凋亡,发现低浓度的苯胺对细胞凋亡影响并不明显,但高浓度的苯胺处理后,细胞凋亡和坏死数量显著增加。ROS含量和GSH含量检测结果显示,较低浓度的苯胺对细胞氧化应激反应并无显著影响,但浓度至0.1μg·mL-1时,细胞较对照组出现明显的氧化应激反应,说明细胞已受损,再继续培养将会导致细胞死亡。上述研究结果提示,高浓度苯胺化合物可显著影响L929细胞存活率,且具有时间和浓度累积效应。其毒性机制可能与细胞内活性氧增加、谷胱甘肽耗竭有关。

【关键词】 苯胺L929细胞细胞毒性细胞凋亡
【基金】 质检总局科技计划项目(2017IK216)
【所属期刊栏目】 专论 (2018年05期)
  • 【分类号】X171.5;R994.6
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】147
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