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Hg2+和Pb2+对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响

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【作者】 林建城罗新明林娟娟

【Author】 Lin Jiancheng;Luo Xinming;Lin Juanjuan;College of Environmental and Biological Engineering,Putian University;Fujian Provincial Key Laboratory of Ecology-toxicological Effects & Control for Emerging Contaminants,Putian University;

【通讯作者】 林建城;

【机构】 莆田学院环境与生物工程学院福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室(莆田学院)

【摘要】 节肢动物蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。为了探究Hg2+和Pb2+这2种重金属离子对节肢动物NAGase的影响,以中国鲎(Tachypleus tridentatus)为材料,从其内脏分离提取了NAGase。利用酶促反应动力学方法,研究Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的影响;通过对酶荧光发射光谱的测定,研究NAGase酶蛋白经Hg2+和Pb2+作用后的空间构象变化。结果表明,Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase均有较强的抑制作用,Hg2+对NAGase的抑制作用强于Pb2+,Hg2+和Pb2+对NAGase的抑制作用均表现为可逆过程,其中Hg2+对NAGase的抑制属于竞争性抑制作用,抑制常数KI为22.68μmol·L-1,Hg2+只与游离酶结合,不与酶-底物络合物结合;而Pb2+对NAGase的抑制是属于竞争性-非竞争性混合型抑制作用,抑制常数KI和KIS分别为19.13 mmol·L-1和75.23 mmol·L-1,Pb2+与游离酶的亲和力相比与酶-底物络合物的亲和力更强。NAGase经Hg2+和Pb2+作用后荧光发射强度均降低,但荧光发射峰值并没有发生位移,说明Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用均为酶蛋白空间构象的变化所致。这证明了Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase活力具调控作用。

【基金】 福建省自然科学基金项目(2018J01467);福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室开放课题(PY16009);莆田学院科研课题(2018005)
【所属期刊栏目】 专论 (2019年05期)
  • 【分类号】X171.5
  • 【下载频次】38
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