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GM-CSF(12-127)突变体生物学活性的研究

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【作者】 李福胜张智清邵华刘红兵侯云德

【Author】 Li Fusheng; Zhang Zhiqing; Shao Hua et al (National Laboratory of Molecular Virology and Genetic Engineering, Beijing 100052)

【机构】 中国预防医学科学院病毒基因工程国家重点实验室!北京100052卫生部长春生物制品研究所

【摘要】 GM-CSF的结构与功能研究表明,N-端的1~13位氨基酸并非生物学活性所必需,且干扰与受体的结合。作者采用PCR突变的方法删除1~11位的氨基酸,保留12位的脯氨酸。突变后的基因经全序列测定证实,之后插入原核高效表达载体pBV220中表达,基因突变后的表达量及表达产物的稳定性均有所提高。大批量表达后经提取包涵体、疏水层析、离子交换层析,最终获得了纯的GM-CSF(12-127)突变体蛋白,其生物学活性比未突变蛋白有明显提高,达3×107U/mg蛋白。受体竞争结合实验显示突变体蛋白受体亲和活性增强。

【关键词】 GM-CSF突变GM-CSF受体亲和力
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.1996.03.97.lifsh.001
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】25
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