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血小板生成素基因的克隆及其初步表达

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【作者】 张琰平樊晓翔张振龙

【Author】 Zhang Yanping, Fan Xiaoxiang, Zhang Zhenlong(National Vaccine and Serum Institute, Beijing 100024)

【机构】 卫生部北京生物制品研究所!北京100024

【摘要】 自 4月龄胎肝中提取总 RNA,经逆转录、多聚酶链反应 (PCR)获得了人血小板生成素 (TPO)全基因 ,长约 10 80 bp。将经限制性内切酶 Nde 和 Hind 双酶切后的 TPO基因与 p RSET A载体相连接 ,转化大肠杆菌后得到两个阳性重组质粒 p T4和 p T10。经核苷酸序列分析证实 ,所克隆的基因与文献报道一致。将 p T4转染 E. coli JM10 9(DE3) ,经 1mmol/ L IPTG诱导表达 ,SDS- PAGE分析 ,相对分子质量约 40 0 0 0处可见一条明显的表达带。

【关键词】 血小板生成素多聚酶链反应克隆
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.1999.01.12.zhangyp.006
  • 【分类号】R394.8
  • 【下载频次】15
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