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人组织激肽释放酶基因的克隆及融合蛋白的表达

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【作者】 石之嶙李体远杜珙黄瑞芳陈德珩戴勇

【Author】 SHI Zhilin,LI Tiyuan,DU Hong et al( Shenzhen People’ s Hospital, Medical College, Jinan University, Shenzhen 518020)

【机构】 暨南大学医学院第二附属医院暨南大学医学院第二附属医院 深圳市人民医院深圳 518020深圳市人民医院深圳 518020

【摘要】 目的 开发激肽释放酶基因工程产品,为开展基因治疗高血压奠定基础。方法 采用RT-PCR的方法合成人胰腺 cDNA,从中扩增出Kallikrein(KK)基因。经 XhoI和EcoR I双酶切后,连接到pET-28b(+)载体上,酶切鉴定后,进行核苷酸序列分析和融合蛋白的表达。结果 将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,与蛋白标准品比较,在相对分子质量31800处可见明显的高表达带。免疫印迹实验表明重组蛋白具有KK的抗原性。结论 已成功克隆并表达了人胰腺组织激肽释放酶基因,为进一步开发基因工程产品及进行基因治疗高血压研究打下了基础。

【关键词】 激肽释放酶基因克隆表达
【基金】 广东省十五攻关课题(C11801);深圳市科技局资助课题(199906014)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2002.06.10.shizhl.003
  • 【分类号】R346
  • 【下载频次】65
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