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幽门螺杆菌过氧化氢酶基因克隆及表达

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【作者】 陶惠朱道银邹全明毛旭虎洪愉

【Author】 TAO Hui, ZHU Daoyin, ZOU Quanming et al (Department of clinical Microbiology and Immunology, Chongqing Medical University, Chongqing 400038) ’

【机构】 第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室重庆医科大学医学微生物及免疫学教研室重庆医科大学医学微生物及免疫学教研室 重庆 400038重庆 400038重庆 400042重庆 400042

【摘要】 目的 克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)过氧化氢酶(katA)基因并在大肠杆菌中进行表达。方法 采用PCR扩增幽门螺杆菌katA全长基因,将其克隆入pET-11c载体中,经测序证实后,在大肠杆菌中进行表达,产物用Western blot检测其抗原性并进行N末端氨基酸的测序。结果 幽门螺杆菌katA基因全长1 518bp,编码氨基酸505个。在BL21(DE3)中的表达量约占细菌总蛋白的24.9%,表达产物经SDS-PAGE显示其相对分子质量与软件预测结果 58 000相符,N末端5个氨基酸测序结果与Hp中天然的katA完全一致,经Western blot检测可被 Hp全菌抗血清识别。结论 katA能在大肠杆菌中进行高效表达,具有良好的免疫反应性,可望为研究 Hp的致病机理、实验诊断及亚单位疫苗等提供充足的katA原材料。

【关键词】 幽门螺杆菌过氧化氢酶大肠杆菌
【基金】 国家“九五”重点科技攻关计划项目(96-901-01-54);国家“十五”计划课题;国家“八六三”计划课题(2001AA215161)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2003.03.26.taoh.009
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】1001
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