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HIV跨膜蛋白gp36和gp41的截短及融合表达

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【作者】 肖健朱华松尹娟孙可芳汪超英端义坤余模松

【Author】 XIAO Jian,ZHU Hua-song,YIN Juan,et al (Wuhan Institute of Biological Products,Wuhan 430060,China)

【机构】 武汉生物制品研究所武汉生物制品研究所 武汉430060武汉430060

【摘要】 目的将HIV-1的跨膜蛋白gp41和HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中进行融合表达。方法用PCR将gp41和gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用BamHⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T-3,导入宿主细胞BL21,用IPTG诱导表达。结果酶切鉴定显示,截短的HIV-1gp41和HIV-2gp36跨膜蛋白基因大小与预期的一致,表达产物经SDS-PAGE分析显示在相对分子质量66000处出现融合表达条带,Westernblot分析显示,与相应抗体出现特异性反应。结论已成功对gp41和gp36跨膜蛋白进行截短,并构建表达载体进行表达,为跨膜蛋白的进一步应用研究奠定基础。

  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2006.02.25.xiaoj.006
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】207
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