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鳗弧菌Vibro anguillarum MVM425sh高效电转化条件的优化

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【作者】 吴海珍张惠展梁娜顾振霆叶江张元兴

【Author】 WU Hai-zhen,ZHANG Hui-zhan,LIANG Na,et al(State Key Laboratory of Bioreactor Engineering,East China University of Science and Technology,Shanghai 200237,China)

【机构】 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 上海200237上海200237

【摘要】 目的建立高效的鳗弧菌电转化系统。方法分别从感受态细胞制备的洗涤缓冲液与浓度、复苏培养基、二级细胞收获时间、电转化的电压与脉冲时间等方面,对鳗弧菌的电转化条件进行优化。结果获得的鳗弧菌最佳转化条件为二级培养3h左右收获细胞,用272mmol/L蔗糖洗涤缓冲液制备电转化细胞,在2.0kV3ms的脉冲条件下,pUC18的转化率达106个转化子/μgDNA。结论采用优化的电转化方法,可获得较高的转化率,为鳗弧菌中的常规遗传操作奠定了良好的基础。

【关键词】 鳗弧菌电转化质粒转化率
【所属期刊栏目】 实验技术 (2007年08期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2007.08.53.wuhzh.005
  • 【分类号】Q789;S941
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】223
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