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人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体的构建

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【作者】 李金波朱雷戚扬孙杰王强苏海滨迟淑平程云

【Author】 LI Jin-bo,ZHU Lei,QI Yang,et al (Department of Immunology,Institute of Infectious Diseases,No.302 Hospital of PLA,Beijing,100039,China)

【机构】 解放军302医院传染病研究所免疫室解放军302医院传染病研究所免疫室 北京100039军事医学科学院基础医学所北京100027北京100039海军总医院药剂科北京100036

【摘要】 目的构建人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达目的蛋白。方法合成人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位的串联基因,克隆入pET-28a(+)载体中,构建重组表达载体pET-28a-H3,经酶切鉴定和DNA序列分析后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并进行ELISA和Westernblot鉴定。结果重组载体pET-28a-H3酶切片段大小和DNA序列分析与预期结果一致。表达的目的蛋白相对分子质量约9400,与相应的多克隆抗体反应性良好。结论已成功构建人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体pET-28a-H3,并表达了目的蛋白,为制备单克隆和多克隆抗体奠定了基础。

【基金】 病原微生物生物安全国家重点实验室开放基金(200503)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2008年03期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.03.15.lijb.002
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】133
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