节点文献

抗菌肽Cecropin D在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定

免费订阅

【作者】 尹娜李鸿钧彭梅谢天宏张光明施锐孙茂盛

【Author】 YIN Na,LI Hong-jun,PENG Mei,et al(Instiute of Medical Biology,Peking Union Medical College,Chinese Academy of Medical Sciences,Kunming 650118,China)

【机构】 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所分子生物室中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所分子生物室 昆明650118昆明650118

【摘要】 目的在毕赤酵母GS115中表达抗菌肽Cecropin D,并检测其抗菌活性。方法根据毕赤酵母密码子的偏爱性,人工合成6条寡聚核苷酸片段,经磷酸化、退火、连接并克隆入酵母表达载体pPIC9K。重组表达质粒pPIC9K-D转化至毕赤酵母菌GS115,经G418筛选,阳性高拷贝克隆用0.5%的甲醇诱导表达,表达产物经CM-Sepharose层析柱纯化,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂糖扩散法和比浊法测定其抗菌活性。结果经Tricine-SDS-PAGE检测,在相对分子质量3900左右处可见目的蛋白表达条带,纯化后的目的蛋白纯度达90%以上,获得的抗菌肽Cecropin D对一些革兰阳性菌和革兰阴性菌均有抑菌活性。结论抗菌肽Cecropin D成功地在毕赤酵母中分泌表达,为以后深入研究抗菌肽奠定了基础。

【关键词】 抗菌肽Cecropin D毕赤酵母分泌表达抗菌活性
【基金】 云南省自然科学基金资助项目(No:2004C0029Q)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2008年03期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.03.22.yinn.005
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】31
  • 【下载频次】745
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: