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口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达

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【作者】 崔丽瑾王兴龙梅英武任林柱闫广谋张辉郎需龙段小宇路浩

【Author】 CUI Li-jin, WANG Xing-long, MEI Ying-wu, et al (College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China)

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院军事医学科学院军事兽医研究所

【摘要】 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。

【基金】 军事医学科学院科技创新基金资助项目;吉林省科技厅科技发展计划项目(20050549)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2008年09期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.09.25.cuilj.004
  • 【分类号】S852.65;Q78
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】181
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