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人NIRF基因真核表达质粒的构建及其在HepG2.2.15细胞中的表达

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【作者】 常蕾段昌柱

【Author】 CHANG Lei, DUAN Chang-zhu (Cell Biology Institute of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China)

【机构】 重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室

【摘要】 目的构建人NIRF基因真核表达质粒,并在HepG2.2.15细胞中表达NIRF蛋白。方法从HeLa细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增NIRF基因编码区全长序列,插入到pIRES2-EGFP真核表达载体中,构建重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-NIRF,转染HepG2.2.15细胞,检测细胞中NIRF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平。结果重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-NIRF经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染HepG2.2.15细胞后,可检测到细胞中NIRF基因mRNA的转录及蛋白的表达。结论已成功构建了人NIRF基因真核表达质粒,并在HepG2.2.15细胞中表达了NIRF蛋白,为下一步研究其在肿瘤组织中的功能奠定了基础。

【基金】 国家自然科学基金资助项目(No30872248);重庆市科技委员会资助(CSTC,2008BB5400);重庆市教育委员会资助(KJ080326)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2009年11期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2009.11.26.changl.003
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】67
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