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RNA聚合酶Ⅱ转录的ALU对PKR磷酸化的调节作用

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【作者】 杨梅沈薇吴进峰曾贵利王峰任红唐开福

【Author】 YANG Mei△,SHEN Wei,WU Jin-feng,et al (△Department of Gastroenterology,The Second Affiliated Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400010,China)

【机构】 重庆医科大学附属第二医院消化内科四川省华蓥市人民医院普外科重庆医科大学附属第二医院肝炎所

【摘要】 目的研究ALU自身的RNA聚合酶Ⅲ启动子对RNA聚合酶Ⅱ转录的影响,探讨RNA聚合酶Ⅱ转录的ALU对PKR磷酸化的调节作用。方法将ALU全基因序列插入pcDNA3.1(-)载体的CMV启动子(一个RNA聚合酶Ⅱ启动子)的下游,构建重组质粒pcDNA3.1-ALU;转染HEK293细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR筛选稳定表达ALU的细胞;用干扰素处理稳定表达ALU序列的细胞,Western blot法检测PKR的磷酸化水平。结果ALU全基因序列插入pcDNA3.1载体的CMV启动子直接下游,能够被RNA聚合酶Ⅱ有效转录;在稳定表达ALU的HEK293细胞中,加干扰素与未加干扰素组PKR的磷酸化水平均明显高于相应的HEK293细胞对照组。结论ALU自身的RNA聚合酶Ⅲ启动子对RNA聚合酶Ⅱ转录无明显影响,但与RNA聚合酶Ⅲ启动下转录的ALU不同,RNA聚合酶Ⅱ转录的ALU失去了对干扰素的拮抗作用,反而可以通过形成双链RNA的方式激活PKR的活性。

【基金】 国家自然科学基金资助(基金号:30700708)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2010年01期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2010.01.28.yangm.001
  • 【分类号】Q75
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】181
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