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重组靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌中试发酵工艺的建立

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【作者】 孙成金王健崔春青郭鹏陈祥鹏张振龙

【Author】 SUN Cheng-jin,WANG Jian,CUI Chun-qing,GUO Peng,CHEN Xiang-peng,ZHANG Zhen-long(National Vaccine & Serum Institute,Beijing 100024,China)

【机构】 北京生物制品研究所第四研究室

【摘要】 目的建立重组靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌的中试发酵工艺。方法优化EGF-E4orf4工程菌二级种子培养时间,按5%的比例接种于20 L发酵培养基,设定培养阶段温度为30℃,诱导表达阶段温度为28℃,在发酵过程中通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施使DO维持在20%~35%,采用三步发酵法进行发酵,优化诱导pH值及诱导时间,并在已优化的工艺条件下,稳定发酵3批。结果确定二级种子的培养时间为15 h,最适诱导pH值为6.0,最适诱导时间为48 h;中试发酵3批,菌体A600均值达(327.67±17.96),菌体湿重均值达(308.33±9.07)g/L,EGF-E4orf4表达量均值为(200.00±5.57)mg/L。结论已初步建立了重组EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌的中试发酵工艺,为EGF-E4orf4的产业化奠定了基础。

【基金】 国家863“基因操作与蛋白质技术”重大专项资助(2008AA02Z118)
【所属期刊栏目】 实验技术 (2011年06期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2011.06.92.sunchj.031
  • 【分类号】R73-3
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】162
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