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Vero细胞无血清培养基的筛选及其培养流感病毒H5N1条件的优化

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【作者】 李在晗苏杨起常亚军杨家方王婷婷杨耀云刘圆圆杨建波唐聪徐丽兰张恒廖国阳李卫东

【Author】 LI Zai-han;SUYang-qi;CHANG Ya-jun;YANG Jia-fang;WANG Ting-ting;YANG Yao-yun;LIU Yuan-yuan;YANG Jian-bo;TANG Cong;XU Li-lan;ZHANG Heng;LIAO Guo-yang;LI Wei-dong;Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College;

【机构】 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所南开大学生命科学学院

【摘要】 目的筛选适宜Vero细胞培养的无血清培养基,并优化其培养流感病毒H5N1的条件。方法取VP-SFM培养的Vero细胞(SFM-Vero),以增殖速率为指标,筛选无血清培养基[VP-SFM、EX-CELLTM VERO、Virus Pro TM VERO、自制无血清培养基1(SFM-1)和2(SFM-2)];采用中心组合实验(Box-Behnken)优化SFM-Vero培养流感病毒H5N1的pH、TPCK-Trypsin浓度和病毒接种MOI。结果 Vero细胞在VP-SFM和自制SFM-1培养基中生长情况好于其他无血清培养基;H5N1病毒株能够感染无血清适应的Vero细胞;SFM-Vero培养流感病毒H5N1较优条件为:p H 7.64,TPCK-Trypsin浓度0.68μg/ml,MOI 0.01。在该条件下培养的流感病毒HA滴度可达768 HAU/50μl,为正常培养基培养的Vero细胞的2.33倍。结论筛选出适宜Vero细胞生长的无血清培养基,优化了流感病毒H5N1 Vero细胞适应株无血清培养的条件。

【基金】 细胞流感减毒活疫苗合作研究(国际科技合作项目,2011DFR30420);腮腺炎减毒活疫苗等病毒性疫苗关键技术及产品研发(2012AA02A404);Vero细胞流感减毒活疫苗研制(2013ZX10004003003002);疫苗研发与新技术应用省创新团队(2015HC027)
【所属期刊栏目】 技术方法 (2016年04期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.001301
  • 【分类号】R373.13
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】288
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